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DC細胞檢測

樹突狀細胞(DC)的主要功能是吸收抗原,進行加工,并向T淋巴細胞呈遞。其它抗原呈遞細胞也有此功能,如B淋巴細胞和單核細胞。 我們常用的檢測指標(biāo): 樹突狀細胞(人): CD83、CD141、、CD209、MHC II 樹突狀細胞(鼠):CD11c、MHC II

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實驗介紹

【技術(shù)原理】

流式利用不同熒光物質(zhì)標(biāo)記的單克隆抗體,與待測成分作用,然后上流式細胞儀檢測待測細胞。待測細胞隨流動室內(nèi)的流動鞘液排列成單列,一個個迅速通過激光聚焦區(qū),激光在對每個細胞進行照射時可同時得到前向角散射和側(cè)向角散射2種散射光以及激發(fā)熒光標(biāo)記物發(fā)出的信號,利用這些信號,可計算出相對含量,從而得到細胞群的相對比值。

樹突狀細胞(DC)的主要功能是吸收抗原,進行加工,并向T淋巴細胞呈遞。其它抗原呈遞細胞也有此功能,如B淋巴細胞和單核細胞。

我們常用的檢測指標(biāo):

樹突狀細胞(人): CD83、CD141、、CD209、MHC II

樹突狀細胞(鼠):CD11c、MHC II


【實驗流程】

組織:制成單細胞懸液-溶血-離心去上清-調(diào)整細胞密度-加入相應(yīng)的標(biāo)記抗體-孵育-離心去上清-上機

血液:溶血-離心去上清-調(diào)整細胞密度-加入相應(yīng)的表面標(biāo)記抗體-孵育-離心去上清-上機

案例展示



注意事項

由于血液和組織中DC細胞含量少,且缺乏特異的DC標(biāo)記物,所以DC細胞的研究非常困難。因此,關(guān)于DC細胞的了解主要來自于通過密度梯度離心、培養(yǎng)、和/或陰性選擇富集后的DC細胞的研究。

這些過程利用了DC細胞的密度和黏附特征,和在一定細胞因子條件下的選擇性生長,或缺乏淋巴細胞、單核細胞和粒細胞的系列標(biāo)記物的表達。但是,這些方法中DC細胞的產(chǎn)率和純度較低,且費時費力。而且,這些操作可以影響細胞的功能,并且無法做DC細胞含量的定量分析。

送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)

樣品類型樣品需求運輸條件
組織離體后組織制成單細胞懸液,加入PBS培養(yǎng)基內(nèi)常溫運輸
活細胞樣本量:1*106個細胞/TEST,加入PBS培養(yǎng)基內(nèi)常溫運輸
血液將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內(nèi)常溫運輸



流式交付標(biāo)準(zhǔn).jpg


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