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粒細(xì)胞檢測實驗原理與流程【粒細(xì)胞檢測外包】

2022-11-15 14:03:19

來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺

        粒細(xì)胞檢測實驗步驟由普拉特澤生物技術(shù)為大家總結(jié)分享,粒細(xì)胞可由其在瑞氏染色下的表現(xiàn)分為中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞三種組成。普拉特澤生物流式檢測平臺為廣大科研人員提供粒細(xì)胞檢測實驗外包服務(wù),一起來學(xué)習(xí)吧!

        粒細(xì)胞檢測最常用的方法是流式檢測,其實驗原理是流式利用不同熒光物質(zhì)標(biāo)記的單克隆抗體,與待測成分作用,然后上流式細(xì)胞儀檢測待測細(xì)胞。待測細(xì)胞隨流動室內(nèi)的流動鞘液排列成單列,一個個迅速通過激光聚焦區(qū),激光在對每個細(xì)胞進(jìn)行照射時可同時得到前向角散射和側(cè)向角散射2種散射光以及激發(fā)熒光標(biāo)記物發(fā)出的信號,利用這些信號,可計算出相對含量,從而得到細(xì)胞群的相對比值。

        一、常用的檢測指標(biāo)中性粒細(xì)胞(人):CD15、CD16、CD49d-

        噬堿性粒細(xì)胞(人):CD123、CD203c、CD117(-)

        噬酸性粒細(xì)胞(人):CD11b、CD193、EMR1

        中性粒細(xì)胞(鼠):CD11b、 Ly6GCD115-

        噬堿性粒細(xì)胞(鼠):CD200R3、 FcεRIα

        噬酸性粒細(xì)胞(鼠):CD11bCD193、F4 / 80

        二、粒細(xì)胞檢測的實驗流程如下

        1、制成單細(xì)胞懸液(組織樣本)

        2溶血(細(xì)胞樣本無需進(jìn)行此步驟)

        3、離心去上清

        4、調(diào)整細(xì)胞密度

        5、加入相應(yīng)的標(biāo)記抗體

        6孵育

        7、洗滌后離心去上清

        8、上機(jī)檢測

        三、粒細(xì)胞檢測注意事項

        1、為保證所得結(jié)果的可靠性,每次實驗前應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球檢測儀器的變異系數(shù);

        2、每次應(yīng)做陰性對照、陽性對照、質(zhì)控對照、以確保將各種試劑及操作過程對結(jié)果的影響降至最低;

        3、外周血單個核細(xì)胞(PBMC)是一些科研實驗中經(jīng)常用的材料,是利用Ficoll從全血中提取得到,主要為淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞;需要檢測粒細(xì)胞等多形核細(xì)胞,就需要避免用PBMC需提供全血。

        好啦,那關(guān)于粒細(xì)胞檢測的實驗方法就講完啦,如果您還還有什么其他的問題的話歡迎隨時聯(lián)系我們~


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