
細胞劃痕實驗原理與操作步驟——細胞劃痕實驗外包
2022-02-28 15:34:03
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學整體課題外包平臺
細胞劃痕實驗原理與詳細的實驗操作步驟由普拉特澤生物細胞實驗平臺為大家總結分享,普拉特澤生物細胞實驗平臺承接包括細胞劃痕實驗、細胞侵襲、細胞增殖、細胞焦亡、細胞衰老等各種細胞實驗的科研外包服務,為廣大辛勤工作的科研工作者提供最貼心的便利服務,普拉特澤生物 = 最真實的實驗結果。話不多說,現(xiàn)在我們來看看:
一,細胞劃痕(Wound Healing)實驗原理
細胞劃痕法是簡捷測定細胞遷移運動與修復能力的方法,類似體外傷口愈合模型,在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細胞上,用微量槍頭或其他硬物在細胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線,去除中央部分的細胞,然后繼續(xù)培養(yǎng)細胞至實驗設定的時間,取出細胞培養(yǎng)板,觀察周邊細胞是否生長至中央劃痕區(qū),以此判斷細胞的生長遷移能力,實驗通常需設定正常對照組和實驗組,實驗組是加了某種處理因素或藥物、外源性基因等的組別,通過不同分組之間的細胞對于劃痕區(qū)的修復能力,可以判斷各組細胞的遷移與修復能力。
二、細胞劃痕(Wound Healing)實驗應用及意義
細胞劃痕(Wound Healing)實驗是一種簡單易行的檢測細胞運動的方法,實驗成本低。常用與用于研究腫瘤細胞的侵襲遷移能力,以及外源因素如,藥物對細胞遷移能力的影響。
三、細胞劃痕實驗步驟
首先所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和 marker 筆在操作前紫外照射 30 min(超凈臺內)。
1、制造傷口:先用 marker 筆在 6 孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔 0.5~1 cm 一道,橫穿過孔每孔至少穿過 5 條線 →在空中加入約5X105 個細胞,具體數(shù)量因細胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿→ 第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜→ 用 PBS 洗細胞 3 次,去處劃下的細胞,加入無血清培養(yǎng)基。
2、階段培養(yǎng)及觀察:放入37度5% CO2 培養(yǎng)箱,階段時間取樣,拍照。
四、細胞劃痕(Wound Healing)實驗注意事項
1、劃痕法測量適用的細胞范圍較小,一般只適用于上皮細胞,纖維樣細胞。
2、雖然無血清培養(yǎng)可以忽略細胞增殖的影響,但是由于細胞內信號傳導系統(tǒng)整體性的下調節(jié),細胞遷移的速度也會慢很多。
OK,細胞劃痕實驗的原理與步驟以及操作時的一些注意事項我們就講完了,大家應該有一個具體的了解了吧,當然有不懂的或者還有要給小編補充說明大聰明歡迎給客服留言哦,小編會第一時間對接技術給到大家最準確專業(yè)的回復,如果您有細胞劃痕實驗外包的需求,請認準普拉特澤!
