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細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)操作問(wèn)題答疑【細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包】

大家好！今天普拉特澤生物帶大家學(xué)習(xí)的是細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)的常見(jiàn)問(wèn)題回答。細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)是觀察掌握細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)過(guò)程中細(xì)胞活動(dòng)的重要實(shí)驗(yàn)方法，普拉特澤生物——細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)操作各類細(xì)胞的劃痕實(shí)驗(yàn)上百例，專業(yè)代做細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和各種細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，對(duì)大家提出的各種關(guān)于細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題都一一做出了回答，希望能對(duì)迷茫的你起到一些幫助~

問(wèn)題一：細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)為什么這么重要？

答：因?yàn)榧?xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)是觀察細(xì)胞遷移活動(dòng)的重要技術(shù)手段，而且簡(jiǎn)單快捷、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠（劃重點(diǎn)?。。。?/span>。細(xì)胞遷移參與到很多的如免疫、炎癥、腫瘤轉(zhuǎn)移、損傷修復(fù)、胚胎發(fā)育等生理和病理的活動(dòng)中，有重要的臨床研究意義。

問(wèn)題二：細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)為什么一般選擇6孔板？

答：因?yàn)?/span>6孔板大小適中，可保證有相當(dāng)距離的平直劃痕，便于觀察;當(dāng)然若是需要高通量初篩時(shí)，也可以用12或者24孔板。

問(wèn)題三：為什么細(xì)胞接種密度要求過(guò)夜100%融合？

答：如果過(guò)夜后細(xì)胞=沒(méi)有100%融合，雖然可以適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間，但因細(xì)胞密度已經(jīng)很大，所以細(xì)胞狀態(tài)會(huì)逐漸變差，后續(xù)細(xì)胞可能不遷移而是凋亡。

問(wèn)題四：怎樣避免細(xì)胞增殖對(duì)細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)造成的假陽(yáng)性結(jié)果？

答：操作如下

1、使用無(wú)血清或低血清培養(yǎng)基(<2%)可降低細(xì)胞增殖對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響

2、一般認(rèn)為24h為細(xì)胞的一個(gè)周期，在選取合適的時(shí)間點(diǎn)(6，12，24h)檢測(cè)劃痕寬度時(shí)，最好不要超過(guò)細(xì)胞一個(gè)周期的時(shí)間

3、如果要單純考慮細(xì)胞遷移，可以先用絲裂霉素(1ug/ml)處理1h，抑制細(xì)胞的分裂。

問(wèn)題五：結(jié)果怎樣拍照？

答：按照6孔板背后畫(huà)線的垂直方向劃痕，可以形成若干交叉點(diǎn)，劃痕一次與5條定位線相交，就有10個(gè)可固定監(jiān)測(cè)點(diǎn)，以解決了前后觀察時(shí)位置不固定的問(wèn)題。

問(wèn)題六：細(xì)胞不遷移怎么回事？

答：避開(kāi)細(xì)胞狀態(tài)的影響，需要考慮細(xì)胞自身的遷移能力，并非所有細(xì)胞都適合劃痕實(shí)驗(yàn)，以乳腺癌為例，乳腺癌細(xì)胞MCF-7幾乎很難遷移，而MDA-MB-231具有很強(qiáng)遷移性。

問(wèn)題七：結(jié)果統(tǒng)計(jì)中，細(xì)胞計(jì)數(shù)和統(tǒng)計(jì)面積那個(gè)好用？

答：根據(jù)細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇。如果細(xì)胞遷移輪廊比較清晰，并且遷移數(shù)量不多，我們可以選擇細(xì)胞計(jì)數(shù)；但如果細(xì)胞數(shù)比較多，連片生長(zhǎng)，那么統(tǒng)計(jì)面積比細(xì)胞計(jì)數(shù)的方式更簡(jiǎn)便且客觀。

問(wèn)題八：細(xì)胞劃痕技術(shù)有什么不足嗎？

答：細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)的不足主要包括：

1、適用的細(xì)胞類型范圍小，一是需要遷移強(qiáng)的細(xì)胞，而且對(duì)無(wú)血清的環(huán)境有較強(qiáng)的忍受力

(至少24h)然而很多腫瘤細(xì)胞系在無(wú)血清培養(yǎng)下，12h細(xì)胞凋廣就超過(guò)50%，因此細(xì)胞劃痕法對(duì)部分腫瘤細(xì)胞并不適用。

2、自身操作的實(shí)驗(yàn)誤差，如劃痕距離不一致等。

好啦，那關(guān)于細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)的各種問(wèn)題咱們的計(jì)數(shù)就暫時(shí)先回答到這里啦，如果您還有更多問(wèn)題需要補(bǔ)充的話可以留言給我們，技術(shù)會(huì)及時(shí)給到回復(fù)與解答的。

當(dāng)然如果您有細(xì)胞劃痕和各類細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包與代做的需求，請(qǐng)一定要認(rèn)準(zhǔn)普拉特澤生物！我們下期見(jiàn)~

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