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        彗星實驗操作步驟由普拉特澤生物為大家總結(jié)分享，文末附有彗星實驗操作視頻教程供大家學(xué)習(xí)。普拉特澤生物細(xì)胞實驗平臺專業(yè)承接彗星實驗代做、外包服務(wù)，彗星實驗作為細(xì)胞平臺的常規(guī)實驗，我們自己總寫了一套專業(yè)高質(zhì)的操作步驟，在此分享給大家，歡迎交流分享哦：

        彗星實驗第一步：分離制備單細(xì)胞懸液：

        （1）體外培養(yǎng)的細(xì)胞株：用胰酶消化，最后用PBS懸浮吹打成單細(xì)胞懸液，細(xì)胞要計數(shù)，具體的量我前邊已經(jīng)說過。

        （2）體內(nèi)臟器細(xì)胞：處死動物，取出臟器，于Hanks’液中制備成單個細(xì)胞懸液。

        彗星實驗第二步：膠板制備：

        （1）取100μl于45℃水浴中保溫的0.5%NMA，鋪于磨沙載玻片上，形成底膠。蓋玻片推勻，不能有氣泡，4度凝固5至8分鐘。

        （2）水平取下蓋片，取100μl于37℃水浴中保溫的0.5%LMA與20μl細(xì)胞懸液（約400彗星實驗）。
   第三步：細(xì)胞裂解與電泳：

        （1）將制備好的膠板去掉蓋玻片后，浸于4℃預(yù)冷的細(xì)胞裂解液中，在4℃下裂解2.5到3小時。

        （2）取出膠板，用雙蒸水浸沒漂洗后放入電泳槽中，浸泡在4℃預(yù)冷的電泳液中解旋20分鐘。

        （3）玻片水平放置陽極端附近，4℃電泳20到25分鐘（25V，300mA）?？稍陔娪静壑車颖鶋K以保持低溫。

        彗星實驗第四步：中和與染色：

        （1）電泳結(jié)束，將膠板浸泡于中和液中，每次10分鐘，共中和3次，每次要更換中和液。最后晾干。

        （2）取出膠板，置于染色缸中，在2μg/ml的EB染色液中，暗處染色5到10分鐘。

        （3）蒸餾水漂洗2次，每次5分鐘。

        好啦，那實驗步驟我們就說到這里啦，視頻教程請點擊：《彗星實驗理論+實操》 。但是要提醒大家，不同的樣本和情況實驗步驟要相應(yīng)的進行調(diào)整哦，如果有把握不準(zhǔn)的歡迎給客服留言，技術(shù)會耐心給大家根據(jù)樣本情況調(diào)整實驗步驟，快來留言吧！