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EMSA凝膠遷移實(shí)驗(yàn)原理介紹

2022-04-28 11:41:04

來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)

    EMSA凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)介紹由普拉特澤生物旗下科研培訓(xùn)品牌春風(fēng)學(xué)院總結(jié)分享,文尾有EMSA實(shí)驗(yàn)理論與實(shí)操視頻教程供大家學(xué)習(xí)。EMSA是一種研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用的技術(shù),而普拉特澤生物作為專門承接各類生物實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)的科研企業(yè),在成百上千次的EMSA實(shí)驗(yàn)操作中積累了豐富的理論與實(shí)操技術(shù)經(jīng)驗(yàn),能在各種情況下的到EMSA實(shí)驗(yàn)的完美結(jié)果,今天小編就簡單介紹一下這個(gè)實(shí)驗(yàn),一起來學(xué)習(xí)吧!

    凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA)是一種研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用的技術(shù),可用于定性和定量分析。這一技術(shù)最初用于研究DNA結(jié)合蛋白,已用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。

    通常將純化的蛋白和細(xì)胞粗提液和32P同位素標(biāo)記的DNARNA探針一同保溫,在非變性的聚丙烯凝膠電泳上,分離復(fù)合物和非結(jié)合的探針。DNA-復(fù)合物或RNA-復(fù)合物比非結(jié)合的探針移動(dòng)得慢。同位素標(biāo)記的探針依研究的結(jié)合蛋白的不同,可是雙鏈或者是單鏈。當(dāng)檢測如轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子一類的DNA結(jié)合蛋白,可用純化蛋白,部分純化蛋白,或核細(xì)胞抽提液。在檢測RNA結(jié)合蛋白時(shí),依據(jù)目的RNA結(jié)合蛋白的位置,可用純化或部分純化的蛋白,也可用核或胞質(zhì)細(xì)胞抽提液。競爭實(shí)驗(yàn)中采用含蛋白結(jié)合序列的DNARNA片段和寡核苷酸片段(特異),和其它非相關(guān)的片段(非特異),來確定DNARNA結(jié)合蛋白的特異性。在競爭的特異和非特異片段的存在下,依據(jù)復(fù)合物的特點(diǎn)和強(qiáng)度來確定特異結(jié)合。

    凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA)可以:

        1.研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用;

        2.可用于DNA定性和定量分析;

        3.用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。  

      EMSA實(shí)驗(yàn)相對(duì)來說沒有非常的復(fù)雜,關(guān)于EMSA更多理論知識(shí)與實(shí)際操作想要學(xué)習(xí)的同學(xué)歡迎點(diǎn)擊《EMSA 理論+實(shí)操》詳細(xì)了解實(shí)踐哦,有關(guān)于EMSA實(shí)驗(yàn)更多問題的同學(xué)歡迎隨時(shí)留言,普拉特澤永遠(yuǎn)在線~

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