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        油紅O染色實(shí)驗(yàn)步驟與注意事項(xiàng)脂肪染色實(shí)驗(yàn)步驟由普拉特澤生物為大家分享。普拉特澤生物病理實(shí)驗(yàn)平臺為廣大科研人員提供長期穩(wěn)定的油紅O染色實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)，歡迎咨詢。本文給大家簡單介紹一下油紅O脂肪染色實(shí)驗(yàn)的詳細(xì)操作步驟：

        一、油紅O染色實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

        1、儀器耗材：生物組織攤烤片機(jī)、3DHISTECH掃描儀、顯微鏡、蓋玻片、載玻片

        2、染色試劑：普拉特澤改良油紅O染色液、甘油明膠、無水乙醇、二甲苯

        3、待測組織的冰凍切片

        二、油紅O染色實(shí)驗(yàn)步驟

        1、冰凍切片厚度6～10 μm，不固定或10%福爾馬林固定10 min后水洗。

        2、切片入蒸餾水中稍沖洗。

        3、切片入70%的乙醇內(nèi)浸洗20～30 s。

        4、切片入改良油紅O染色液中(加蓋)，密閉染色10～15 min。

        5、分色：入70%的乙醇內(nèi)稍洗以便去除染液。

        6、入蒸餾水中稍微清洗。

        7、蘇木素染色液復(fù)染核1～2 min。

        8、(可選)1%的鹽酸溶液稍微分化一下。

        9、(可選)自來水漂洗10 min或稀碳酸鋰溶液中促藍(lán)。

        10、入蒸餾水中稍微清洗。

        11、用濾紙吸干周圍水分。

        12、甘油明膠或阿拉伯糖膠封固。

        三、油紅O染色注意事項(xiàng)

        1、石蠟切片不能用于油紅O染色，原因在于石蠟包埋過程中需要脫水，脫水過程中需要乙醇-二甲苯和石蠟，二甲苯是有機(jī)溶劑，會把中性脂肪溶解；、

        2、 冰凍切片準(zhǔn)備時，包埋的降溫過程建議選擇干冰，原因在于若選擇液氮降溫過程較強(qiáng)烈，可能導(dǎo)致組織內(nèi)部炸裂，而干冰降溫的過程比較緩和，染出來的片子比較好看；

        3、切片的厚度要稍微厚一些，建議選擇8-10 μm；

        4、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)建議設(shè)計(jì)陰性對照和陽性對照，如陽性對照可以用脂質(zhì)豐富的肝臟組織等，陰性對照可以根據(jù)文獻(xiàn)來選擇無脂肪沉積的組織。

        好啦，那關(guān)于油紅O脂肪染色實(shí)驗(yàn)步驟和注意事項(xiàng)小編就簡單介紹到這里啦，還有什么不懂得可以直接留言哦，小編會隨時查看將您的問題咨詢技術(shù)后寫成技術(shù)答疑供大家一起學(xué)習(xí)進(jìn)步喲~歡迎留言！