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細胞培養(yǎng)基的理化性質(zhì)和基本成分【細胞實驗外包】

2022-08-25 14:58:48

來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺

  大家好,今天普拉特澤生物為大家介紹的是細胞培養(yǎng)基的理化性質(zhì)和基本成分。普拉特澤生物——細胞實驗平臺不僅可以承接代做細胞實驗外包更有自己的細胞庫可以購買細胞,而培養(yǎng)基不管是在細胞實驗中還是在細胞的培養(yǎng)傳代中最重要的外在因素,因此技術(shù)專門為大家出一期關(guān)于培養(yǎng)基的理化性質(zhì)和基本成分來幫助大家了解和挑選培養(yǎng)基。

細胞在培養(yǎng)基中,不僅能夠存活,還要分裂增殖,因此合適的滲透壓,PH值、溫度等理化性質(zhì)是細胞培養(yǎng)基必須具備的前提條件,咱們一個一個看:

1、PH值
大多數(shù)動物細胞的適宜PH在7.2~7.4之間;一些正常的成纖維細胞系卻在PH7.4~7.7之間生長較好,而一些轉(zhuǎn)化細胞可能在PH7.0~7.4之間生長較好。細胞培養(yǎng)基的PH值通常依靠細胞培養(yǎng)基中的酚紅指示劑來判斷,不同的PH,培養(yǎng)基會呈現(xiàn)不同的顏色變化,PH7.8時,呈現(xiàn)紫色,PH7.6呈現(xiàn)桃紅色,PH7.4呈現(xiàn)紅色,PH7.0呈現(xiàn)橘紅色,PH6.5時呈現(xiàn)檸檬黃色。

2、緩沖能力

細胞培養(yǎng)基應(yīng)具有一定的緩沖能力。細胞代謝過程中產(chǎn)生的CO2是造成細胞培養(yǎng)基PH值波動的主要原因,在封閉式培養(yǎng)過程中CO2與水結(jié)合產(chǎn)生酸,細胞培養(yǎng)基PH值很快下降;打開培養(yǎng)器皿時CO2逸出則會引起PH值升高。NaHCO3-CO2緩沖系統(tǒng)是細胞培養(yǎng)基中最常用的緩沖系統(tǒng),此外磷酸鹽緩沖系統(tǒng)也可以獲得緩沖能力,相比碳酸鹽緩沖系統(tǒng)其能力較低,但因其對細胞毒性小,成本低,在細胞培養(yǎng)中也得到廣泛應(yīng)用。還有一種較為常用的緩沖液是HEPES(羥乙基哌嗪硫磺酸)液,它是一種非離子兩性緩沖液,在PH7.0~7.2范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,在細胞培養(yǎng)基中添加合適濃度的HEPES,可以較好地控制PH值在適宜的范圍內(nèi),然而高濃度的HEPES可能對細胞有毒性作用,所以在細胞培養(yǎng)時添加的濃度一般為10-25mmol/L.

3、滲透壓

細胞必須生活在等滲的環(huán)境中,大多數(shù)體外培養(yǎng)的細胞對滲透壓有一定的耐受性。人血漿滲透壓約為290 mOsm/kg,可視為培養(yǎng)人體細胞的理想滲透壓。鼠細胞的滲透壓在320 mOsm/kg左右。研究顯示,對于大多數(shù)哺乳動物細胞,滲透壓在290-320 mOsm/kg的范圍內(nèi)都適宜。在生產(chǎn)、配制細胞培養(yǎng)基的過程中,滲透壓的測定可以防止在生產(chǎn)中出現(xiàn)稱量錯誤。

4、溫度

溫度對培養(yǎng)基有較大的影響。較高的溫度可引起營養(yǎng)成分的降解或破壞,細胞培養(yǎng)基的PH值,離子強度和電解常數(shù)等都可能會受到影響。

細胞培養(yǎng)基必須含有充分的營養(yǎng)物質(zhì),滿足完成新細胞合成、細胞代謝等生物反應(yīng)所需要的物質(zhì)和能量。細胞培養(yǎng)基的主要成分有水,氨基酸,維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助營養(yǎng)物質(zhì)。傳統(tǒng)的合成細胞培養(yǎng)基在使用時還需要添加一定量的血清才能促進細胞生長和繁殖。低血清細胞培養(yǎng)基或無血清細胞培養(yǎng)基則是在合成細胞培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,通過調(diào)整營養(yǎng)成分配比和含量,或添加一些血清代替因子,來滿足細胞在低血清或無血清狀態(tài)下的生長需求。

1、水

水不僅是細胞的主要成分,也是細胞賴以生存的主要環(huán)境,營養(yǎng)物質(zhì)、代謝產(chǎn)物都必須溶解在水中,才能被細胞吸收和排泄。細胞培養(yǎng)基中90%以上的成分是水。在配制細胞培養(yǎng)基時,需要用到新鮮制備的超純水,不同地區(qū)水質(zhì)可能偏酸或偏堿,在配制細胞培養(yǎng)基時,pH需要調(diào)節(jié)到適宜的范圍。

2、能源和碳源

能源和碳源主要用于維持細胞生命和支持細胞生長,主要包括糖,糖酵解的產(chǎn)物和谷氨酰胺,其他氨基酸是次要的能源和碳源物質(zhì)。目前大多數(shù)細胞體外培養(yǎng)時都會選擇葡萄糖作為主要碳源和能源。

3、氮源

不同細胞對氨基酸的需求各異,一些必須氨基酸在細胞中不能合成,比如組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸、纈氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、精氨酸及谷氨酰胺等,在細胞培養(yǎng)基中添加的濃度較高,尤其是谷氨酰胺對細胞生長的影響非常大,許多對谷氨酰胺依賴性較強的細胞甚至需要在培養(yǎng)基的基礎(chǔ)濃度上額外添加。而非必須氨基酸,細胞可以自己合成或通過其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化得到,也需要在培養(yǎng)基中添加適當(dāng)濃度來減輕細胞在合成方面的負擔(dān)。

 4、維生素

維生素是維持細胞正常生理狀態(tài)的一種重要的活性物質(zhì),對細胞代謝有重要作用,但是在不同配方的培養(yǎng)基中濃度差異較大。

 5、無機離子

無機鹽是細胞維持生命活動所不可缺少的營養(yǎng)成分。無機離子主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+、CI-、PO43-、SO42-、HCO3-等,維持細胞培養(yǎng)基滲透壓平衡,參加細胞的活動代謝。在細胞培養(yǎng)過程中,各種離子會起到不同的作用,不同細胞對離子濃度的需求也會有差異。保持培養(yǎng)基中離子濃度的穩(wěn)定以及各種離子間的平衡具有重要意義。
        好啦,那關(guān)于細胞培養(yǎng)基的介紹我們就講完啦,如果您也想要培養(yǎng)細胞或細胞實驗需要外包、買細胞的話都可以直接留言哦,普拉特澤生物細胞平臺的技術(shù)門斗歡迎跟大家進行技術(shù)上的交流~


        

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