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大家好，今天普拉特澤生物開(kāi)始介紹所有細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)都要學(xué)習(xí)的最基礎(chǔ)的一個(gè)東西——細(xì)胞培養(yǎng)，本單元由普拉特澤生物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)技術(shù)據(jù)多年實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)而來(lái)，如果您也養(yǎng)不活細(xì)胞或有細(xì)胞實(shí)驗(yàn)代做的需求，歡迎各位來(lái)學(xué)習(xí)交流！無(wú)論是什么細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，如果連細(xì)胞都養(yǎng)不活、養(yǎng)不好傳不了，那后期再好的理論、技術(shù)、經(jīng)驗(yàn)都百搭，那老規(guī)矩首先我們先來(lái)看看什么是細(xì)胞培養(yǎng)，它有哪些分類、方法、與要求呢？

什么是細(xì)胞培養(yǎng)？

細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無(wú)菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等），使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)必不可少的環(huán)節(jié)，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。

我們主要培養(yǎng)哪些細(xì)胞？各自有什么培養(yǎng)的要點(diǎn)嗎？

細(xì)胞培養(yǎng)的類別主要有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、植物細(xì)胞培養(yǎng)、微生物細(xì)胞培養(yǎng)三類。

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：所有的細(xì)胞離體培養(yǎng)中，最困難的是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常需要血清、支持物、氣體交換這三個(gè)條件。

植物細(xì)胞培養(yǎng)：離體培養(yǎng)的植物細(xì)胞對(duì)光照條件相對(duì)動(dòng)物細(xì)胞簡(jiǎn)單，不甚嚴(yán)格。主要是光照與植物激素這兩個(gè)條件需要滿足。

微生物細(xì)胞培養(yǎng)：微生物多為單細(xì)胞生物，野生生存條件比較簡(jiǎn)單。厭氧微生物培養(yǎng)嚴(yán)格控制好二氧化碳等非惰性氣體的濃度，好氧微生物只需要用普通的玉米漿、麥芽汁等培養(yǎng)就行，對(duì)于一些需要特殊營(yíng)養(yǎng)的微生物可以單獨(dú)添加。

小鼠結(jié)締組織細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)要注意哪些環(huán)境條件？

1、無(wú)菌環(huán)境：無(wú)毒和無(wú)菌是體外培養(yǎng)細(xì)胞的首要條件。為保證細(xì)胞能在體外環(huán)境中生長(zhǎng)繁殖，必須要確保無(wú)菌工作區(qū)域、良好的個(gè)人衛(wèi)生、無(wú)菌試劑和培養(yǎng)基以及無(wú)菌操作。

2、合適的溫度：不適宜的環(huán)境溫度會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。細(xì)胞對(duì)低溫的耐受能力要強(qiáng)于對(duì)高溫的耐受能力，在低溫下，細(xì)胞的代謝活力及核分裂能力降低。若溫度不低于0℃，雖然細(xì)胞代謝受到影響，但無(wú)損傷作用；25～35℃時(shí)，細(xì)胞以緩慢的速度生長(zhǎng)；但若被置于40℃數(shù)小時(shí)，則不僅不利于細(xì)胞生存、生長(zhǎng)，甚至可導(dǎo)致其死亡。

3、適宜的滲透壓：高滲溶液或低滲溶液會(huì)引起細(xì)胞發(fā)生褶皺、腫脹、破裂。因此，滲透壓是體外培養(yǎng)細(xì)胞的重要條件之一。多數(shù)體外培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)滲透壓都有一定的耐受能力，實(shí)際應(yīng)用中，260～320mmol/L的滲透壓可適用于大多數(shù)細(xì)胞。

4、氣體環(huán)境與pH：大多數(shù)細(xì)胞適宜的pH范圍往往是7.2～7.4。在開(kāi)放式培養(yǎng)中，以5%的二氧化碳?xì)怏w比例為宜。

細(xì)胞培養(yǎng)主要分為哪些操作步驟呢？

1、器材準(zhǔn)備工作

準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無(wú)菌室或超凈臺(tái)的清潔與消毒，培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試，具體內(nèi)容可參閱有關(guān)文獻(xiàn)。

2、細(xì)胞取材

在無(wú)菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞（視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?，?jīng)過(guò)一定的處理（如消化分散細(xì)胞、分離等）后接入培養(yǎng)器皿中，這一過(guò)程稱為取材。取材后應(yīng)立即處理，盡快培養(yǎng)，因故不能馬上培養(yǎng)時(shí)，可將組織塊切成黃豆般大的小塊，置4℃的培養(yǎng)液中保存。

3、細(xì)胞培養(yǎng)：將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過(guò)程稱為培養(yǎng)。（后期專門講各種細(xì)胞的培養(yǎng)步驟）

4、細(xì)胞凍存與復(fù)蘇：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。（后期專門講細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的步驟）

好啦，那細(xì)胞培養(yǎng)的簡(jiǎn)單介紹我們就介紹到這里啦！后期我們一個(gè)個(gè)給大家介紹各種細(xì)胞的培養(yǎng)步驟、細(xì)胞的凍存、復(fù)蘇、傳代等各種操作的步驟與方法！敬請(qǐng)期待~我們下期見(jiàn)！

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