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HE檢測實驗報告（五）由普拉特澤生物技術為大家總結分享。本文是關于HE染色實驗的最后一篇介紹，前面我們學習了大鼠骨組織的HE染色實驗報告、小鼠肺組織結節(jié)的HE染色實驗報告、小鼠肺HE染色實驗報告以及大鼠心肌的HE檢測實驗報告，可以點擊標題直接傳送回去學習的哦。普拉特澤生物病理染色平臺承接染色實驗外包上百例，早就為大家把實驗過程中要踩的雷、吃的虧幫大家吃完了，現在我們就來看看HE檢測實驗報告（五）

前期回顧：

HE檢測實驗報告（一）

HE檢測實驗報告（二）

HE檢測實驗報告（三）

HE檢測實驗報告（四）

一、實驗目的
對骨組織樣本進行脫鈣及HE染色。
二、實驗樣本及分組

樣本：大鼠、小鼠關節(jié)骨組織

分組：第一批、第二批、第三批

三、實驗結果

第一批

第二批

第三批

HE染示意圖 40X

四、實驗結論

樣本中細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色。細胞質被伊紅染成深淺不同的粉紅色至深紅色。對比鮮明，可以清晰觀察到組織形態(tài)。

五、實驗材料

1. 主要儀器

2.主要試劑

六、實驗原理

蘇木精-伊紅染色法簡稱HE染色法，是最常用的染色方法。蘇木精（hematoxylin）是陽離子染料，能夠將細胞核內的嗜堿性物質染成藍紫色。伊紅（eosin）是陰離子染料，能夠將細胞質和膠原纖維等染成粉紅色。

七、方法步驟

1.脫鈣包埋
①取大小鼠骨組織中性福爾馬林固定。
②骨組織浸入EDTA脫鈣液，每周更換一次脫鈣液，脫鈣4-12周（根據組織大小決定）。
③脫鈣終點評判：針扎切割無阻力感。
④脫鈣結束后的骨組織用自來水流水沖洗12-24h。
⑤骨組織脫水浸蠟包埋切片。
2. 脫蠟
①70℃烤片30 min；
②二甲苯（I）中脫蠟10 min；
③二甲苯（II）中脫蠟10 min；
④100%乙醇（I）中5 min洗去二甲苯；
⑤100%乙醇（II）中5 min洗去二甲苯；
3.水化
①95%乙醇中水化5 min；
②85%乙醇中水化5 min；
③75%乙醇中水化5 min；
④蒸餾水中水化待用；
4.染色
①蘇木素染色3 min；
②流水沖洗2 min；
③1%鹽酸酒精分化2 s；
④流水沖洗切片15 min；
⑤蒸餾水過洗1-2 s；
⑥伊紅染色30 s；
5.分化
①根據顏色深淺用80%的乙醇分化；
②85%乙醇脫水5 min；
③95%乙醇脫水5 min；
④無水乙醇脫水10 min；
⑤無水乙醇脫水10 min；
6.透明
①二甲苯（I）透明10 min；
②二甲苯（II）再次透明10 min；
7.封片
①在石蠟切片的中央滴加一滴中性樹膠，蓋上蓋玻片封固。
8.鏡檢

①顯微鏡下觀察拍照。

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