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在miRNA研究的這條路已經(jīng)車水馬龍了，如何在蕓蕓眾生中抓住審稿人的視線獲得高分文章，就需要研究者有豐富的知識體系和創(chuàng)新精神了。

這次小編帶大家解讀的文獻就很好的詮釋了這點：咱不研究miRNA，咱研究功能跟miRNA很相似的RNA結合蛋白。下面就跟著小編來看下這篇文獻吧。

文章題目：

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翻譯：RNA結合蛋白ZFP36L1與HSP70家族在骨性關節(jié)炎OA中的作用

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一、名詞解釋：

HSPA1A：熱休克蛋白70（HSP70）家族成員之一

ZFP36：一種古老的RNA結合蛋白，可以與靶mRNA的3'-UTR中的ARE結合來觸發(fā)ARE介導的mRNA去穩(wěn)定化

二、研究背景：

骨關節(jié)炎（OA）是導致殘疾的主要原因，軟骨破壞作為OA發(fā)病機制標志是由基質降解酶的上調或軟骨細胞外基質（ECM）分子的下調引起的。RNA結合蛋白可以直接結合其靶mRNA的3'-非翻譯區(qū)（3'-UTR）中的富含AU的元件（ARE），并促進poly-A尾部去除和mRNA衰變。

三、研究正文：

研究者首先在OA患者和OA模型小鼠（DMM韌帶剪斷手術造模）的軟骨組織中發(fā)現(xiàn)ZFP36L1的蛋白含量相比于正常軟骨組織有明顯的升高，同時基質降解酶MMP3、MMP13表達下調（見下圖（a）IHC檢測結果）。

作者猜測ZFP36L1可能與OA有關。于是通過構建腺病毒過表達系統(tǒng)，在動物模型上實現(xiàn)ZFP36L1的上調表達。發(fā)現(xiàn)：ZFP36L1的過表達并不影響OA的疾病進程，即既不改變軟骨組織中基質降解酶的含量也不影響軟骨細胞外基質（ECM）相關分子Coll-II和Aggrecan的表達改變（下圖c）。

隨后，作者制備了兩種不同的模型鼠：

① 12周齡的Zfp36l1-/-基因敲除雄性小鼠，并做韌帶切斷手術制備OA模型；

② 常規(guī)小鼠做韌帶切斷后尾靜脈注射Zfp36l1干擾腺病毒；發(fā)現(xiàn)Zfp36l1低表達的小鼠模型中，OA的疾病表癥顯著低于未敲除組：番紅固綠染色（下圖a&c），OA評級、骨錐成熟度、軟骨下骨板厚度（下圖b&d），

以上作者充分證實了ZFP36L1的下調表達能夠顯著的抑制骨性關節(jié)炎，那么接下來，作者進一步探討了ZFP36L1在OA中的作用機制。

首先，先上一波測序，作者發(fā)現(xiàn)對ZFP36L1進行shRNA干擾后，有18個基因的mRNA水平出現(xiàn)了顯著上調（flod change＞2.0），以Hspa1a和Hspa1b最為顯著（下圖a）。由于HSPA1a和HSPA1b結構差別不大（10個核苷酸和1個氨基酸的差別），在此作者接下來只研究HSPA1a。作者通過RIP發(fā)現(xiàn)ZFP36L1結合HSPA1a的3'-UTR區(qū)（下圖d），由此可得ZFP36L1直接調控HSPA1a。

考慮到熱休克蛋白70（HSP70）家族對多種細胞的炎癥，氧化應激和細胞凋亡有保護作用，為了驗證HSPA1a是否參與ZFP36L1敲低對OA發(fā)病機制的抑制作用，研究者用腺病毒在OA模型鼠中過表達了HSPA1a（下圖a），并在DMM處理后的AO模型小鼠的膝關節(jié)軟骨組織發(fā)現(xiàn)：HSPA1a過表達組中番紅固綠染色顯示炎性減弱（下圖b&c），OA評級下降、骨錐成熟度無顯著性差異、軟骨下骨板厚度無顯著差異（下圖d）。

我們通常認為OA的發(fā)病機制主要是由：①由基質降解酶的上調；②軟骨細胞外基質（ECM）分子的下調；③軟骨細胞的凋亡引起的。

作者發(fā)現(xiàn)ZFP36L1敲低或HSPA1a過表達對基質降解酶和軟骨ECM分子的表達水平并沒有顯著改變，可見二者并不是ZFP36L1-HSP70途徑的直接靶標。考慮到軟骨細胞的凋亡在OA軟骨破壞中也起著重要作用，且HSPA1a有已知的可以保護各種細胞類型免于凋亡的功能。于是作者檢查了HSPA1a是否可以通過防止軟骨細胞凋亡從而達到抑制OA的作用。于是在過表達HSPA1a的OA模型鼠中觀察到了軟骨細胞凋亡的顯著減少，由此得出結論：HSPA1a可以直接抑制軟骨細胞凋亡。

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最后，研究者調查了HSPA1a在ZFP36L1上調/下調的OA模型鼠中的作用，發(fā)現(xiàn)HSPA1a的敲除促進了ZFP36L1在OA中的軟骨侵蝕能力，但不影響骨贅形成或軟骨下骨板增厚。

四、總結：

文章的幾個主要結論：

1、OA中RNA結合蛋白ZFP36L1的特異性上調，但外源進行ZFP36L1基因的過表達并不能影響OA的疾病進程，反之敲除可抑制。

2、ZFP36L1的直接作用靶點為HSPA1a，HSPA1a通過抑制軟骨細胞凋亡來預防OA，不參與骨贅形成和軟骨下骨板增厚。

3、在OA小鼠模型中，于膝關節(jié)腔中注射ZFP36L1-shRNA腺病毒或HSPA1a的過表達腺病毒能夠緩解小鼠的疾病進程。

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