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動(dòng)物組織甲苯胺藍(lán)染色步驟【甲苯胺藍(lán)染色外包】

2022-12-20 16:04:29

來(lái)源/作者:普拉特澤-病理染色技術(shù)平臺(tái)

        大家好!今天普拉特澤生物繼續(xù)帶大家一起學(xué)習(xí)新實(shí)驗(yàn)——甲苯胺藍(lán)染色,甲苯胺藍(lán)染色是病理學(xué)中常用的特殊染色,用于顯示各種組織成分、細(xì)胞等。普拉特澤生物病理實(shí)驗(yàn)平臺(tái)長(zhǎng)期為大家提供甲苯胺藍(lán)染色代做外包服務(wù),本文跟大家分享動(dòng)物組織樣本甲苯胺藍(lán)染色的實(shí)驗(yàn)步驟:

        一、甲苯胺藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)原理與準(zhǔn)備

        甲苯胺藍(lán)染色原理:甲苯胺藍(lán)(Toluidine Blue)是一種常用的人工合成染料,屬于醌亞胺染料類。這類染料主要含有胺基和醌型苯環(huán)兩個(gè)發(fā)色團(tuán),從而成色原顯色。甲苯胺藍(lán)中的陽(yáng)離子有染色作用,組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽(yáng)離子相結(jié)合而被染色。甲苯胺藍(lán)不僅含有兩個(gè)發(fā)色團(tuán),還含有兩個(gè)助色團(tuán),能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類,幫助發(fā)色團(tuán)對(duì)組織產(chǎn)生染色力,使切片上的組織細(xì)胞著色,可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色。甲苯胺藍(lán)染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸鹽法)由于硼酸鹽緩沖液呈強(qiáng)堿性,更利于組織細(xì)胞的著色。

        儀器準(zhǔn)備:生物組織攤烤片機(jī)、切片機(jī)、顯微鏡、蓋玻片、載玻片

        試劑準(zhǔn)備:甲苯胺藍(lán)染色液、中性樹膠、無(wú)水乙醇、二甲苯

        二、甲苯胺藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)步驟(以動(dòng)物組織為例)

        1、脫蠟

        170℃烤片5 min

        2二甲苯(I)中脫蠟10 min;

        3二甲苯(II)中脫蠟10 min;

        4100%乙醇(I)中5 min洗去二甲苯;

        5) 100%乙醇(II)中5 min洗去二甲苯;

        2、水化

        195%乙醇中水化1 min;

        285%乙醇中水化1 min

        375%乙醇中水化1 min;

        4蒸餾水中水化待用;

        3、染色

        1甲苯胺藍(lán)染色液染色30 min

        2流水沖洗2 min;

        31%鹽酸酒精分化至軟骨細(xì)胞呈紫藍(lán)色清楚可見;

        4流水沖洗切片5 min

        4蒸餾水過(guò)洗1-2 s;

        4、脫水

        185%乙醇脫水1 min;

        295%乙醇脫水1 min

        3無(wú)水乙醇脫水1 min;

        4無(wú)水乙醇脫水1 min;

        5、透明

        1二甲苯(I)透明2 min;

        2二甲苯(II)再次透明2 min

        6封片、鏡檢

        在石蠟切片的中央滴加一滴中性樹膠,蓋上蓋玻片封固顯微鏡下觀察拍照。

        好啦,動(dòng)物組織的甲苯胺藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)步驟咱們就介紹完啦,如果您也對(duì)甲苯胺藍(lán)染色感興趣或正在準(zhǔn)備甲苯胺藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)的話歡迎隨時(shí)咨詢普拉特澤生物~

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