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        動(dòng)物組織番紅固綠染色實(shí)驗(yàn)步驟由普拉特澤生物病理實(shí)驗(yàn)平臺(tái)為大家總結(jié)分享。普拉特澤生物為廣大科研人員提供長期穩(wěn)定的番紅固綠染色外包實(shí)驗(yàn)服務(wù)，本文給大家分享咱們技術(shù)長期總結(jié)下來的動(dòng)物組織番紅固綠組織染色實(shí)驗(yàn)步驟：

        一、番紅固綠染色原理與實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

        番紅固綠染色原理：改良番紅O-固綠軟骨染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅O結(jié)合呈現(xiàn)紅色，嗜酸性的骨和酸性染料固綠結(jié)合而成綠色或藍(lán)色，與呈現(xiàn)紅色的軟骨對(duì)比鮮明，從而將軟骨組織和骨組織區(qū)分開。番紅O是一種結(jié)合多陰離子的陽離子染料，其顯示軟骨組織是基于陽離子染料與多糖中陰離子基團(tuán)（硫酸軟骨素或硫酸角質(zhì)素）結(jié)合。番紅O著色與陰離子的濃度近似成正比關(guān)系，間接反映了基質(zhì)中蛋白多糖的含量和分布。當(dāng)軟骨受到損傷時(shí)，軟骨中的糖蛋白會(huì)釋放出來，使基質(zhì)成分分布不均勻，從而導(dǎo)致番紅O淡染或不著色。通過圖像分析軟件可對(duì)番紅O染色的軟骨基質(zhì)進(jìn)行定量分析。

        1、實(shí)驗(yàn)儀器準(zhǔn)備：組織脫水儀、石蠟或冰凍包埋儀、組織切片機(jī)、組織攤片/烤片機(jī)、光學(xué)顯微鏡/玻片掃描儀等

        2、實(shí)驗(yàn)試劑準(zhǔn)備：番紅O-固綠軟骨染色液、中性樹膠、無水乙醇、二甲苯

        
二、番紅固綠染色實(shí)驗(yàn)步驟（以軟骨組織為例）
    1、組織樣本脫蠟

        （1） 70℃烤片30 min；

        （2）二甲苯（I）中脫蠟10 min；

        （3）二甲苯（II）中脫蠟10 min；

        （4）100%乙醇（I）中5 min洗去二甲苯；

        （5）100%乙醇（II）中5 min洗去二甲苯；

   2、組織樣本水化

        （1）95%乙醇中水化5 min；

        （2）85%乙醇中水化5 min；

        （3）75%乙醇中水化5 min；

        （4）蒸餾水中水化待用；

   3、染色

        （1）入新鮮配制的Weigert染液染色3-5min；

        （2）流水沖洗2 min；

        （3） 酸性分化液分化15s；

        （4）蒸餾水洗10min；

        （5）在固綠染色液內(nèi)浸染5min；

        （6）快速用弱酸溶液洗滌切片10-15s，以便去除殘留的固綠；

        （7）入Saftanin O stain內(nèi)浸染5min；

   4、脫水

        （1） 95%乙醇脫水2-3s；

        （2）無水乙醇脫水2-3s；

        （3） 無水乙醇脫水1 min；

   5、透明

        （1）二甲苯（I）透明2 min；

        （2）二甲苯（II）再次透明2 min；

   6、封片鏡檢

        （1）在石蠟切片的中央滴加一滴中性樹膠，蓋上蓋玻片封固。

        （2）顯微鏡下拍照，或在組織掃描儀下進(jìn)行玻片的全景掃描。

        好啦，動(dòng)物軟骨組織的番紅固綠染色實(shí)驗(yàn)步驟咱們就講到這里啦，如果您還有其他的問題或有番紅固綠染色實(shí)驗(yàn)外包的需求歡迎隨時(shí)咨詢~