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DNA甲基化實(shí)驗(yàn)介紹由普拉特澤生物總結(jié)分享。DNA甲基化為DNA化學(xué)修飾的一種形式，能夠在不改變DNA序列的前提下，改變遺傳表現(xiàn)。普拉特澤生物表達(dá)檢測(cè)平臺(tái)為廣大科研人員提供DNA甲基化檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，用豐富的實(shí)戰(zhàn)操作經(jīng)驗(yàn)給出高質(zhì)的結(jié)果。

那么現(xiàn)在我們來(lái)看看，什么是DNA甲基化呢？

DNA甲基化（DNA methylation）為DNA化學(xué)修飾的一種形式，能夠在不改變DNA序列的前提下，改變遺傳表現(xiàn)。所謂DNA甲基化是指在DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶的作用下，在基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5號(hào)碳位共價(jià)鍵結(jié)合一個(gè)甲基基團(tuán)。大量研究表明，DNA甲基化能引起染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、DNA構(gòu)象、DNA穩(wěn)定性及DNA與蛋白質(zhì)相互作用方式的改變，從而控制基因表達(dá)。

DNA甲基化的實(shí)驗(yàn)原理是：基因組中DNA的甲基化模式是通過(guò)DNA甲基轉(zhuǎn)移酶實(shí)現(xiàn)的。DNA甲基化酶分為2類，即維持DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶（Dnmtl或維持甲基化酶）和從頭甲基化酶。根據(jù)序列的同源性和功能，真核生物DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶又分為4類：Dnmtl/METl、Dnmt2、CMTs和Dn-mt3。Dnmtl/MET類酶參與CG序列甲基化的維持。CMTs類酶僅發(fā)現(xiàn)在植物中，主要特征是它的催化區(qū)T和Ⅳ包埋染色體的主區(qū)，并且特異性地維持CG序列的甲基化。Dnmt3類酶在小鼠、人類和斑馬魚中得到鑒定．Dnmt3a和Dnmt3b在未分化的胚胎干細(xì)胞中高度表達(dá)，但在體細(xì)胞中表達(dá)水平很低。它們的主要作用是從頭甲基化，但對(duì)維持甲基化也起到一定的作用，并且負(fù)責(zé)重復(fù)序列的甲基化。

DNA甲基化類型：DNA甲基化反應(yīng)分為2種類型。一種是2條鏈均未甲基化的DNA被甲基化，稱為從頭甲基化（denovo methylation）；另一種是雙鏈DNA的其中一條鏈已存在甲基化，另一條未甲基化的鏈被甲基化，這種類型稱為保留甲基化（maintenance methylation）。

DNA甲基化（methylation）是真核細(xì)胞正常而普遍的修飾方式，也是哺乳動(dòng)物基因表達(dá)調(diào)控的主要表觀遺傳學(xué)形式。DNA甲基化后核苷酸順序及其組成雖未發(fā)生改變，但基因表達(dá)受影響。盡管甲基化修飾有多種方式，被修飾位點(diǎn)的堿基可以是腺嘌呤的N-6位、胞嘧啶的N-4位、鳥嘌呤的N-7位和胞嘧啶的C-5位，它們分別由不同的DNA甲基化酶催化，但大多發(fā)生在基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島上。DNA甲基化時(shí)，胞嘧啶從DNA雙螺旋上突出，進(jìn)入能與酶結(jié)合的裂隙中，在胞嘧啶甲基轉(zhuǎn)移酶催化下，把活性的甲基從S一腺苷甲硫氨酸轉(zhuǎn)移至胞嘧啶5位上，形成5一甲基胞嘧啶（5一MC）。基因啟動(dòng)子區(qū)的甲基化可導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄沉寂。

細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中，各種表觀遺傳學(xué)現(xiàn)象之間不是孤立存在而是密切聯(lián)系的。DNA甲基化同組蛋白甲基化共同調(diào)控基因表達(dá)的現(xiàn)象最早在鏈孢霉（Neurospora crassa）中得到證實(shí)，進(jìn)一步的生化研究結(jié)果表明，DNA甲基化是受組蛋白甲基化調(diào)節(jié)的。對(duì)哺乳動(dòng)物的研究發(fā)現(xiàn)，DNA甲基化是建立和維持其他表觀遺傳學(xué)現(xiàn)象的基礎(chǔ)，比如DNA甲基化位點(diǎn)可以募集諸如組蛋白去乙?；傅染哂幸种乒δ艿膹?fù)合物，同時(shí)除掉該位點(diǎn)附近的組蛋白乙酰化標(biāo)記。也有研究認(rèn)為，DNA甲基化是受組蛋白修飾調(diào)控的，有報(bào)道稱組蛋白修飾H3K9me能夠促進(jìn)DNA甲基化的進(jìn)程。

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